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Tipo: Trabalho de Conclusão de Curso
Título: Encapsulamento e conservação via congelamento a -80ºc de embriões maduros de Butia capitata (Mart.) Becc
Autor(es): Guterres, Suelen Martinez
Primeiro Orientador: Boldo, Juliano Tomazzoni
1° Membro da banca: Santos, Daniele Damian dos
2° Membro da banca: Ornellas, Thiago Sanches
Resumo: A família Arecaceae está distribuída por vários países da América do Sul. Dentro dessa família está a espécie Butia capitata (Mart.) Becc., que encontra-se atualmente ameaçada pelo desmatamento e pelo extrativismo predatório, o que acaba limitando o estabelecimento de bancos de sementes. Com o objetivo de solucionar problemas decorrentes da dificuldade de germinação e da desuniformidade das plântulas formadas in situ, a propagação in vitro, via cultura de embriões, é uma ferramenta de grande importância para espécies do gênero Butia. . O processo de criopreservação é, em teoria, aplicável a quaisquer tecidos que tenham capacidade de regeneração, tendo sido aplicado com sucesso em várias espécies vegetais, utilizando como fonte calos, ápices, embriões somáticos e zigóticos e células em suspenção. Tratando-se de criopreservação, destaca-se o uso da tecnologia de sementes sintéticas, uma ferramenta biotecnológica de fácil produção e manipulação de propágulos, abrindo perspectivas promissoras em áreas como a de intercâmbio de germoplasma. Concomitantemente com o desenvolvimento da técnica de sementes sintéticas foram desenvolvidas outras diferentes maneiras de criopreservação, entre elas o encapsulamento desidratação e o encapsulamento-vitrificação. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o uso das técnicas de encapsulamento-desidratação e encapsulamento-vitrificação, visando a preservação por congelamento da espécie Butia capitata e avaliar o uso do encapsulamento na sua germinação. Foram coletados frutos maduros de Butia capitata de matrizes localizadas no município de São Gabriel/RS. O mesocarpo e o endocarpo do fruto foram retirados para a obtenção das amêndoas, sendo excisadas com o auxílio de um bisturi para realizar o resgate dos embriões, que sofreram uma desinfestação utilizando 0,25% de hipoclorito de sódio por 10 minutos e lavados em água destilada estéril por 10 minutos. Para o encapsulamento dos embriões foi utilizado alginato de sódio 2,5% diluído em meio ½ MS e foi utilizado cloreto de cálcio 0,1 M para que ocorresse a sua complexação. No T0, os embriões foram inoculados meio de cultura ½ MS. No T1 os embriões foram encapsulados e postos para germinar, T2 os embriões foram encapsulados e expostos a -80 ºC, T3 os embriões foram encapsulados, submetidos a uma desidratação em sílica gel no fluxo laminar por um período de 4 horas e expostos a -80 °C. No T4 os embriões foram encapsulados, desidratados em 0,3 M, e 0,6 M de sacarose e depois foram embebidos em solução PVS3. Os tratamentos, T3 e T4, também foram submetidos a temperatura de -80 ºC por 4 horas e depois descongelados a 60 ºC por 90 segundos. As porcentagens de germinação obtidas foram de 91,7% e 70,8% para T0 e T1, respectivamente. Os embriões dos tratamentos T2, T3 e T4 não germinaram. Concluímos que foi possível obter a germinação dos embriões apenas quando não houve congelamento, sugerindo assim novos estudos para a criopreservação da espécie.
Abstract: The Arecaceae family is distributed in several South American countries. Within this family is the species Butia capitata (Mart.) Becc., Which is currently threatened by deforestation and predatory extraction, which eventually limits the establishment of banks. seeds. In order to solve problems arising from the difficulty of germination and the unevenness of seedlings formed in situ, in vitro propagation via embryo culture is a very important tool for Butia species. . The cryopreservation process is theoretically applicable to any regenerative tissue and has been successfully applied to various plant species using callus, apex, somatic and zygotic embryos and suspen- sive cells. In the case of cryopreservation, the use of synthetic seed technology, a biotechnological tool of easy production and manipulation of propagules, stands out, opening promising perspectives in areas such as germplasm exchange. Concurrent with the development of the synthetic seed technique other different ways of cryopreservation were developed, including encapsulation-dehydration and encapsulation-vitrification. The objective of the present study was to evaluate the use of encapsulation-dehydration and encapsulation-vitrification techniques, aiming at freezing preservation of the species Butia capitata and to evaluate the use of encapsulation in its germination. Ripe fruits of Butia capitata were collected from matrices located in São Gabriel / RS. The mesocarp and endocarp of the fruit were removed to obtain the almonds, excised with the help of a scalpel to rescue the embryos, which suffered a disinfestation using 0.25% sodium hypochlorite for 10 minutes and washed in water. sterile distilled for 10 minutes. For embryo encapsulation, 2.5% sodium alginate diluted in ½ MS medium was used and 0.1 M calcium chloride was used for its complexation. At T0, the embryos were inoculated with culture medium ½ MS. At T1 the embryos were encapsulated and germinated, T2 the embryos were encapsulated and exposed to -80 ° C, T3 the embryos were encapsulated, subjected to laminar flow silica gel dehydration for 4 hours and exposed to -80 ° C. ° C. At T4 the embryos were encapsulated, dehydrated to 0.3 M, and 0.6 M sucrose and then soaked in PVS3 solution. The treatments T3 and T4 were also subjected to a temperature of -80ºC for 4 hours and then thawed at 60ºC for 90 seconds. The germination percentages obtained were 91.7% and 70.8% for T0 and T1, respectively. The embryos of treatments T2, T3 and T4 did not germinate. We concluded that it was possible to obtain embryo germination only when there was no freezing, thus suggesting further studies for the cryopreservation of the species.
Palavras-chave: Embriões zigóticos
Encapsulamento
Criopreservação
Zygotic embryos
Encapsulation
Cryopreservation
CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
Idioma: por
País: Brasil
Editor: Universidade Federal do Pampa
Sigla da Instituição: UNIPAMPA
Campus: Campus São Gabriel
Citação: GUTERRES, Suelen Martinez. Encapsulamento e conservação via congelamento a -80ºc de embriões maduros de Butia capitata (Mart.) Becc. 2019. 36 p. Trabalho de Conclusão do Curso (Bacharelado em Biotecnologia) - Universidade Federal do Pampa, Campus São Gabriel, São Gabriel, 2019.
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
URI: https://repositorio.unipampa.edu.br/jspui/handle/riu/7216
Data do documento: 28-Nov-2019
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