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Tipo: Tese
Título : Germinação e morfogênese in vitro de Plinia peruviana (POIR.) Govaerts (myrtaceae): uma análise morfoanatômica da calogênese e da embriogênese somática
Autor(es): Santos , Daniele Damian dos
Primeiro Orientador: Stefenon , Valdir Marcos
Coorientador: Poletto, Igor
1° Membro da banca: Pescador, Rosete
2° Membro da banca: Paranhos, Juçara Terezinha
3° Membro da banca: Pinheiro, Marcos Vinícius Marques
Resumo: Plinia peruviana (Poir.) Govaerts conhecida popularmente como jabuticabeira é uma espécie nativa do Brasil e pertencente à família Myrtaceae. Um obstáculo encontrado para a produção comercial de mudas é a sua propagação, sendo considerada de difícil cultivo quando propagada por sementes (devido a assíncronia no desenvolvimento de mudas, longo período juvenil e sementes com características de recalcitrância) ou através da propagação vegetativa convencional (taxas de enraizamento obtidas são moderadas a baixas, além da ausência de estudos focando no desenvolvimento a longo prazo das mudas a campo). Há uma perspectiva de crescimento na comercialização e utilização pelas indústrias, com isso estudos relacionados a propagação e conservação da espécie tornam-se necessários. Assim, a presente tese está estruturada em três capítulos. O capítulo I apresenta uma revisão de literatura, atualizando o estado da arte do uso de ferramentas biotecnológicas em Plinia spp., enfatizando a necessidade do uso de abordagens moleculares para resolver as incertezas taxonômicas entre as espécies e o estabelecimento de protocolos de propagação in vitro para superar as dificuldades relacionadas ao seu cultivo. O capítulo II visa a germinação de sementes e a calogênese in vitro, além da caracterização morfoanatômica dos calos. Para germinação in vitro testou-se métodos de desinfestação das sementes (com álcool 70%, NaOCl e água ultrapura autoclavada), e para calogênese explantes (segmentos nodais e discos foliares) e combinações de ANA (ácido naftalenoacético) e BAP (6-benzilaminopurina). Houve sucesso no estabelecimento de plântulas de jabuticabeira a partir da germinação in vitro, indicando-se o álcool 70% por 2 minutos e o enxágue triplo em água ultrapura autoclavada para desinfestação das sementes, promovendo o melhor IVG e com germinação de 98%. A calogênese e rizogênese em segmentos nodais ocorreu tanto na ausência como presença de PGRs (ANA e BAP), e em discos foliares somente com a adição de PGRs no meio de cultivo, em concentrações iguais ou superiores a 5,40 µM de ANA + 0,44 µM de BAP. Os calos obtidos apresentaram características não embriogênicas, com células parenquimáticas grandes, desorganizadas e vacuolizadas. O capítulo III objetiva a indução da embriogênese somática (ES) a partir de explantes obtidos de sementes maduras, testando-se concentrações (10, 20 e 30 µM) de 2,4-D e tempos de exposição (1, 3, 5 e 7 dias), além da caracterização morfoanatômica e ultraestrutural de embriões somáticos e/ou calos. A formação de embriões somáticos ocorreu de maneira direta nos explantes (sem necessidade de formação de calos), assíncrona e com desenvolvimento de alguns embriões anômalos, além da ocorrência de embriogênese somática repetitiva. A ES foi dependente da adição de 2,4-D em meio de cultura, com destaque para a concentração de 20 µM de 2,4-D por 5 dias de exposição, que promoveu o percentual de formação de 26,66%. Com as análises anatômicas e ultraestruturais os embriões foram caracterizados em diferentes estádios de desenvolvimento e foi possível identificar algumas anormalidades (embriões fusionados, ausência ou formação de apenas um ou múltiplos cotilédones, ausência ou pouco desenvolvimento de células procambiais, cotilédones anormais e não formação de meristema apical). A calogênese foi dependente da adição de 2,4-D em meio de cultivo, e a concentração de 20 µM de 2,4-D por 1 dia de exposição foi a mais promissora. Os calos apresentaram morfologia e coloração diversa com presença de células não embriogênicas. As análises desenvolvidas no presente estudo podem contribuir para que novos protocolos de propagação in vitro sejam aprimorados em P. peruviana.
Resumen : Plinia peruviana (Poir.) Govaerts popularly known as jabuticabeira is a species native to Brazil and belonging to the Myrtaceae family. An obstacle found for the commercial production of seedlings is their propagation, being considered difficult to cultivate when propagated by seeds (due to asynchrony in the development of seedlings, long juvenile period and seeds with recalcitrance characteristics) or through conventional vegetative propagation (rates rooting rates obtained are moderate to low, in addition to the absence of studies focusing on the long-term development of seedlings in the field). There is a prospect of growth in commercialization and use by industries, with that studies related to the propagation and conservation of the species become necessary. Thus, this thesis is structured in three chapters. Chapter I presents a literature review, updating the state of the art in the use of biotechnological tools in Plinia spp., emphasizing the need to use molecular approaches to resolve taxonomic uncertainties between species and the establishment of in vitro propagation protocols to overcome the difficulties related to its cultivation. Chapter II focuses on seed germination and in vitro callogenesis, in addition to the morphoanatomical characterization of calluses. For in vitro germination, seed disinfestation methods were tested (with 70% alcohol, NaOCl and autoclaved ultrapure water), and for callogenesis explant sources (nodal segments and leaf discs) and combinations of NAA (naphthaleneacetic acid) and BAP (6 - benzylaminopurine). There was success in the establishment of jabuticabeira seedlings from in vitro germination, indicating 70% alcohol for 2 minutes and triple rinsing in autoclaved ultrapure water for seed disinfestation, promoting the best GSI and with 98% germination. Callogenesis and rhizogenesis in nodal segments occurred both in the absence and presence of PGRs (NAA and BAP), and in leaf discs only with the addition of PGRs in the culture medium, in concentrations equal to or greater than 5.40 µM of NAA + 0 .44 µM BAP. The calli obtained showed non embryogenic characteristics, with large, disorganized and vacuolated parenchyma cells. Chapter III aims at the induction of somatic embryogenesis (ES) from explants obtained from mature seeds, testing concentrations (10, 20 and 30 µM) of 2,4-D and exposure times (1, 3, 5 and 7 days), in addition to the morphoanatomical and ultrastructural characterization of somatic embryos and/or calluses. The formation of somatic embryos occurred directly in the explants (without the need for callus formation), asynchronously and with the development of some anomalous embryos, in addition to the occurrence of repetitive somatic embryogenesis. SE was dependent on the addition of 2,4-D in the culture medium, with emphasis on the concentration of 20 µM of 2,4-D for 5 days of exposure, which promoted the percentage of formation of 26.66%. With the anatomical and ultrastructural analyses, the embryos were characterized at different stages of development and it was possible to identify some abnormalities (fused embryos, absence or formation of only one or multiple cotyledons, absence or little development of procambial cells, abnormal cotyledons and no meristem formation apical). Callogenesis was dependent on the addition of 2,4-D in the culture medium, and the concentration of 20 µM of 2,4-D for 1 day of exposure was the most promising. The calli showed different morphology and coloration with the presence of non-embryogenic cells. The analyzes developed in the present study can contribute to the improvement of new in vitro propagation protocols in P. peruviana.
Palabras clave : Jabuticabeira
Biotecnologia
Propagação in vitro
Caracterização anatômica
Biotechnology
In vitro propagation
Ultrastructural characterization
CNPQ: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
Idioma: por
metadata.dc.publisher.country: Brasil
Editorial : Universidade Federal do Pampa
Sigla da Instituição: UNIPAMPA
Campus: Campus São Gabriel
Curso: Doutorado em Ciências Biológicas
Citación : SANTOS, Daniele Damian dos. Germinação e morfogênese in vitro de Plinia peruviana (POIR.) Govaerts (myrtaceae): uma análise morfoanatômica da calogênese e da embriogênese somática. 2023. 143 p. Tese(Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal do Pampa, Campus São Gabriel, São Gabriel, 2023.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI : https://repositorio.unipampa.edu.br/jspui/handle/riu/8584
Fecha de publicación : 31-mar-2023
Aparece en las colecciones: Doutorado em Ciências Biológicas



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